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落泪天使

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】载体构建 已有9人参与

我准备构建载体,我要在引物的两端加酶切位点,试问是否将终止密码子去除?请多多指教!
有的同学说可以将终止密码子去除,因为载体上面有转录密码子,也有的同学说一定要在终止密码子那加酶切位点。
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lstt09nk:交流贴请勿纯表~~ 2010-06-21 10:26:52
2楼2010-06-21 10:02:02
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不能去出吧,除非载体上的有终止密码子能够为你所用,就可以直接用载体上的。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-06-21 10:24:18
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-06-22 18:24:01
不能去掉啊
去掉了读码框就变了,表达的蛋白后面会多出来几个氨基酸,要是一直遇不上终止密码通读下去的话,那表达出来的都成什么了。。。

载体上的一般是终止子,也就是转录的终止信号,不是终止密码子(这个是翻译的终止信号)
4楼2010-06-21 11:59:51
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落泪天使

新虫 (初入文坛)

谢谢各位
5楼2010-06-21 13:25:27
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ymzfeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用去除吧
直接在扩增基因全长序列的引物上加酶切位点是可行的
6楼2010-06-21 15:20:22
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lly198784

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不用去的。
7楼2010-06-22 15:17:40
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chenyuqin

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,看你的实验目的了,如果是构建定位载体连接GFP的话一般都要去除的
where there is a will,there ia a way.
8楼2010-06-22 18:19:38
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smallcat227

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用去除
9楼2010-06-22 21:49:32
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ilxly

木虫 (小有名气)

是不用去的。
10楼2010-06-23 01:28:26
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