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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么总是摇菌失败
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resurgam

木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-06-18 16:33:37
引用回帖:
Originally posted by poog502 at 2010-06-18 14:55:23:
下次用枪头挑单菌落，用后把枪头留在摇瓶里，直接摇菌过夜。

那你就挑一个长得稍微大一点的克隆好了。一般都像2楼所说的这样用枪头挑了直接摇。因为有的人会用接种针挑，挑克隆前在酒精灯上烤得太久温度太高，接种针直接把菌烫死了。

你说提质粒提的不好，可以：
1、转速不要太高
2、不要等细菌浓度长到非常浓才提。

如果你养的是酵母，酵母生长比细菌要慢，请耐心等待

[ Last edited by resurgam on 2010-6-18 at 15:43 ]
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11楼2010-06-18 15:40:41
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
噬菌体感染不严重的时候也会出现LZ说的现象，需要排除。
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12楼2010-06-18 15:45:57
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bunny0512

银虫 (小有名气)
是不是培养基问题？重新配下看看？PH值如何？
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在哪里~在哪里见过你~
13楼2010-06-18 16:02:49
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liyong1981

金虫 (正式写手)
噬菌体侵染，菌照样会长得很快~~浑浊~~浑浊~
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14楼2010-06-18 16:31:42
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woke2008

新虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-06-19 07:11:20
是不是感受态细胞的问题吧（TOP10的很容易出问题）！也有可能是培养基里面有清洁剂吧！还有就是低级原因：抗性是否正确！其他的我一时还没想到！
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忘记了该怎么忘记该怎么办！
15楼2010-06-18 18:27:56
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466183013

新虫 (初入文坛)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-19 07:11:09
估计是假阳性的，你鉴定时做过阴性对照吗？

加抗生素也别加太多，加多了，就很难长起来。

注意无菌操作，
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16楼2010-06-19 00:20:03
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yaojc

木虫 (正式写手)
细节决定成败，从每个操作上找原因吧
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专注、专心、专业
17楼2010-06-19 07:35:19
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月下老人

木虫 (著名写手)
dhd997:牙签灭菌了吗？ 2010-06-19 08:55:09
引用回帖:
Originally posted by yinsongna at 2010-06-18 14:47:31:
挑多少死多少，要么是摇起来了 ，质粒提不出来，各位虫子有知道是怎么回事的吗？

我都直接把牙签丢到摇瓶里。
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18楼2010-06-19 08:51:26
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛～
yinsongna(金币+1): 2010-06-22 15:07:05
有没有以前保存的质粒啊  重新转化挑单克隆  这样比较保险
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平和悦衲！
19楼2010-06-19 09:57:33
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月月大可

木虫 (著名写手)
yinsongna(金币+1): 2010-06-22 15:07:08
从头认真检查每一步，一定把心沉下来去检查每一个细节。对于可能的原因进行分析，挑最有可能的先尝试，一个一个排除。
摇菌提质粒最最基础的东西
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20楼2010-06-19 12:06:59
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