| 查看: 1497 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
lfgc8505金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】PFU扩不出东西来，请各路大侠帮帮小虫啊~~~~~~~ 已有11人参与
|
||
|
最近在做PCR，因为要扩的片段比较长，1800BP.用专扩长片段的LA酶扩了，效果可以，但是测序发现有突变，因为我要求不能有突变，所以没用。改用promega的PFU后，怎么都扩不出东西来，退火温度都试了（50-65），之前用的是57度都能扩出来。 我的反应程序，是95 3分钟 95 30秒 50/65 30秒 72 4分钟 30个循环 72 10分钟 反应体系使用的是说明书上的推荐体系。 但是就是没有我的目的条带，只有两条约800和300的杂带！ 崩溃了，这马上又要回报了，还是做出来啊~请各路虫友帮帮忙啊。发表一下你们的高建啊！ 小虫不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有216人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，换了高保真酶扩不出来目的条带
已经有26人回复
jasco
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1626.1
- 红花: 3
- 帖子: 991
- 在线: 82小时
- 虫号: 287776
- 注册: 2006-10-21
- 专业: 生物化学
5楼2010-06-17 11:01:20
zemin_fang
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3643.4
- 红花: 4
- 帖子: 327
- 在线: 79.2小时
- 虫号: 465566
- 注册: 2007-11-22
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2010-06-17 10:22:03
3楼2010-06-17 10:45:45
月月大可
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2010-06-17 10:46:59
