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天使托

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[交流] 【求助/交流】求助：关于做过量表达的基因的引物设计！已有3人参与

我现在要做一个基因的过量表达，需要设计这个基因的引物，听师姐说要保证这个基因的完整性，必须把启动子包含进去，不知道这个引物如何来进行设计，复制序列设计引物的时候往这个基因前多少bp复制?我所用的载体质粒上面有一个强启动子。
还有启动子（原核）一般是在基因前面具体什么位置?
谢谢！

[ Last edited by 天使托 on 2010-6-13 at 21:33 ]

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1楼 2010-06-13 21:12:47

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引用回帖:

Originally posted by dfl204 at 2010-06-13 21:17:16:
没有必要包含启动子部分吧。
如果一定要有的话，应该是一段5‘UTR的序列；
如果所用载体本身携带有启动子的话，按其终止的位置到目的基因之间不能有ATG起始密码子，如果有，到你目的基因的地方也需要是3的倍数， ...

所用的载体质粒上面有一个强的启动子，但是我觉得如果你所想过量表达的基因没有自身启动子的话，对于整个基因的表达会不会有什么影响？还有就是如果不带自身启动子的话，一般设计引物的时候往这个目的基因前多少bp复制序列啊？谢谢了！