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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】IPTG诱导剂的用量
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woke2008

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】IPTG诱导剂的用量 已有5人参与

各位大虾，请问蓝白斑筛选IPTG诱导剂的用量是多少(不涂平板,直接加到培养基里面的)？
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忘记了该怎么忘记该怎么办！
1楼 2010-06-12 09:52:43
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jgsghw

铜虫 (初入文坛)
woke2008(金币+1): 2010-06-13 13:25:13
2mmol/L
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2楼2010-06-12 09:53:40
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jasco

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1):正解 2010-06-12 11:47:45
woke2008(金币+1): 2010-06-13 13:25:10
最好从1mM开始尝试诱导表达，梯度可用：0.05mM，0.3mM，0.5mM，0.7mM，1mM，2mM，，，，，，摸索最佳用量
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3楼2010-06-12 10:00:37
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liyong1981

金虫 (正式写手)
woke2008(金币+1): 2010-06-13 13:25:07
1就可以了哦～
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4楼2010-06-12 11:47:07
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
woke2008(金币+2): 2010-06-13 13:24:59
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2010-06-12 13:10:45
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣
2楼的方法较好
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dasheng1980
6楼2011-10-23 16:12:56
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