| 查看: 5413 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
honglanbai木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】悬浮细胞 挑单克隆 已有3人参与
|
||
|
有谁做过悬浮细胞挑单克隆的。 1.大家都是用什么方法挑的呀，有的说用有限稀释法，有的说先稀释好一个浓度，然后铺一个孔有一个或者0.5个细胞，但是怎么才能确定一定是单克隆啊，有的时候即使你稀释的很低，也会有几个细胞在一起？ 2.96孔板一般铺完几天不动，要不要换液，几天换一次，怎么换液？ 3.有没有做过CHO-S的挑单克隆的。 4.细胞不爱活怎么办，谁有好办法吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有172人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于连接、转化、挑取单克隆的问题
已经有3人回复
- Crispr/Cas9 基因敲除：有限稀释法（单克隆挑选）
已经有70人回复
- 单克隆抗体的纯化
已经有4人回复
- 如何用悬浮细胞做激光共聚焦
已经有6人回复
- 重组质粒转入BL21后，平板可以长，但挑单克隆菌摇不起来
已经有17人回复
- 感受态转化及阳性克隆出现问题
已经有15人回复
- 质粒非单克隆，怎么办？
已经有7人回复
- 挑取单克隆后的PCR验证
已经有3人回复
- 有没有什么好方法来挑选阳性克隆
已经有5人回复
- 转化后涂布，阴性对照培养皿上长有一两个菌落，能否继续在阳性平皿上挑单克隆？
已经有4人回复
- 平板能长，挑单克隆却不长啊啊啊啊啊
已经有12人回复
- 悬浮细胞的转染
已经有7人回复
- 转化后单克隆都一样吗
已经有13人回复
- 关于悬浮细胞MTT的一点疑问，求解答！
已经有11人回复
- 挑单克隆后，菌液PCR检测所有条带都偏小，目的条带没有出现
已经有9人回复
- 细胞融合时候第一次克隆化生长的细胞为什么不能保证是单克隆化？
已经有4人回复
- 组织块贴壁法培养细胞如何做？
已经有7人回复
- 从 单克隆杂交瘤细胞 到 抗体序列（抗体测序）
已经有24人回复
- 酵母菌被摇成豆腐渣了，急急急！！！
已经有21人回复
- 【求助/交流】T载体转化挑单克隆加的LB培养基里加抗生素么
已经有6人回复
- 【分享】农杆菌感受态制备和转化方法
已经有19人回复
- 【求助/交流】悬浮细胞附着壁底的问题 K562
已经有8人回复
- 【分享】G418筛选稳定表达细胞系
已经有17人回复
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
honglanbai(金币+1): 2010-11-08 10:11:06
|
普通书上推荐的就是有限稀释法，如果你稀释之后还是有一个孔出现多个克隆的请款个，说明你在前面计数的时候不是很准确，数的太少了。另一个方面是你的细胞并没有完全分散，所以你可以铺几个不同的浓度，以保证一次试验中等到你想要的单克隆。 是否跟换培养基要依据你细胞的生长特性来判断，一般前几天不要动细胞板，避免晃动。 “细胞不爱活”不知道什么意思？我想有几个原因，有可能细胞原来状态不好 ，分散之后细胞生存能力更差了。也有可能前面状态好，但是因为细胞密度太小了，也不是很好存活等原因。你可以考虑提高培养基中营养成分或者加入一定的细胞因子或者加入一定的饲养层等方法试试。 |
4楼2010-06-11 14:01:48
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2010-06-10 11:28:19
honglanbai
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5808.2
- 散金: 21
- 红花: 1
- 帖子: 454
- 在线: 66.8小时
- 虫号: 478698
- 注册: 2007-12-14
- 性别: GG
- 专业: 催化化学
。5楼2010-06-11 15:56:41
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
6楼2010-06-11 20:27:52
10