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bully518

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】请液相高手指教已有4人参与

最近在做一个样品，采用梯度洗脱，但是调了好多次梯度26min和32min的大峰分不开。流动相 A:乙酸铵-乙酸：甲醇=80：20； B甲醇：乙腈=1：1. 梯度0-40min B相由45%升到100%，40-45min B 相保持100%5min，45-50minB相由100%降至45%，50.01min stop。现在梯度已经很缓了，但是两个大峰仍然分不开，小生很着急，还请高手指教，色谱图如下：

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1楼 2010-06-09 13:04:40

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bully518

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引用回帖:

Originally posted by oxygen7341 at 2010-06-09 19:16:17:
你用碱性流动相试试，不用你那么复杂，就ph=9，醋酸氨体系为A相，B相用乙腈，或者甲醇，走一个梯度看看，不行就换成酸性体系，把ph调到3。说实在的，你的流动相配置太复杂了，走不成熟产品时候，那样的流动相不适应

多谢前辈指点。之所以选用那个流动相体系是考虑到以后要做液质的。我酸的碱的都做过了，不过碱的只做到8，再碱柱子受不了。酸的现在是3.5.