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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】请教：检测波长问题？
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wolfmanh

[交流] 【求助】请教：检测波长问题？ 已有4人参与

各位大侠，本人处理狗空白全血上液相感觉杂质很多主要在9分钟以前，问题是杂质峰拖尾影响后面的主药出峰，引起基线漂移，最郁闷的是主要出峰的位置空白血也有小峰，想调节流动相错开，调了几次但几乎都在一个位置出峰分不开，请问怎么办？
   新买的shim-pack C18柱子，柱温70，流动相先前用乙腈：甲醇：水=70：8：22，现在不用甲醇了，检测波长210nm.
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1楼 2010-06-08 13:50:15
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yangliu77

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
铁甲骑兵(金币+1):呵呵，学习了。 2010-06-10 08:28:50
关于血的确实不好分离，况且还是加内标物 的。我刚才看了你的流动相，很少人把乙腈跟甲醇配比然后跟水一起用的吧。你要么选择乙腈跟水，要么选择甲醇跟水配比，直接用水应该也不行，得弄个缓冲液，比如说磷酸一类的，具体的哪一种缓冲液，浓度为多少得看你实验需求。流动相设置一个梯度，这样更利于分离。还有，你进样前有没过滤膜？这个很关键哦。

至于那个检测波长，我以前做实验前查的文献中，所用的检测波长不一，你这方法经过改造的，也不能照搬人家所用的波长，建议你拿到紫外分光那边做个全波长扫描，比较好的吸收波长一目了然。
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8楼2010-06-09 17:35:45
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mytll

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
铁甲骑兵(金币+1):具体什么试剂呢？ 2010-06-08 14:31:38
我想你应该用离子对试剂试试
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2楼2010-06-08 13:58:12
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wolfmanh

引用回帖:
Originally posted by mytll at 2010-06-08 13:58:12:
我想你应该用离子对试剂试试

样品处理过程如下：取全血1ml置于10ml,加一定量内标，加入NaOH溶液2ml,涡旋2min，加无水乙醚(重蒸）4ml,涡旋5min，3000 转每分钟离心15分钟，取乙醚层40度水浴氮气吹干，加入酸化甲醇溶液（盐酸：甲醇=1：3）200微升重组，加正己烷0.5ml涡旋30秒，3000转每分钟离心10分钟，弃去正己烷层去下层清夜20微升进样。
   大家看处理过程有什么问题？怎么优化？
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3楼2010-06-08 22:29:20
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wolfmanh

怎么没谁给回答下？
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4楼2010-06-09 10:13:31
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