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qingsong35

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】请教pPIC9K问题已有3人参与

请教一下各位前辈，质粒pPIC9K上的HIS和Knanmycin如何表达，好像在载体上没有看到它们的启动子序列啊？！载体pPICZA上的Zeocin有Ptef1和Pem7启动子，能够启动Zeocin在酵母和大肠中的表达，那么pPIC9K上的HIS和Knanmycin是怎么表达的呢？谢谢

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1楼2010-06-07 19:08:36

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风荻

金虫 (小有名气)

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

酵母基因组上有AOX基因，他帮忙整合，不影响他对后面的两个基因的启动的
整合上去后，它应该还是完整的，具有启动功能
比如3’AOX分两部分: 1-2，基因组上整合时也分开成两部分：2-1，
这样它整合上去后就是1（基因组）-----2（9k）1----2（基因组）
这样3’AOX他是能保证完整功能启动后面了

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7楼2010-06-09 11:11:28

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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖甜到憂傷

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scelab(金币+3):谢谢交流！:tiger06: 2010-06-07 22:01:46

kan基因与表达盒之间是遗传连锁关系，所以应该与目的基因共用pAOX1。
His4我觉得有两种情况，一种情况是双交换时，整个表达元件整合进基因组替换了AOX1，此时His4与Kan一样，与目的基因共用pAOX1;另一种情况是单交换，在His4处用Sal I 线性化，整合位点在基因组His4基因处，这样原本his-表型变为His+，这时His4的表达用的是基因组上自身His4 promoter。

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Thank-you，so-blue.