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wuweibewin

金虫 (正式写手)

[交流] DNA的沉淀问题

DNA（CTAB法大量提取，用于Southern杂交）用无水乙醇（或异丙醇）沉淀，发现有两种形态，一是DNA抱成团状，可用剪头移液枪转移;另一则是成散絮状（碎片状），只能用离心的方法得到沉淀；
谁能解释一下不同形态形成的原因？是否与DNA浓度、质量、以及材料处理方法有关？

本人今年一月份所沉的DNA均呈团状，而最近提的却既有团状又有碎片状，有一次甚至都是碎片状。
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wuwei_hello@163.com
1楼2010-06-07 15:02:21
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柳飞絮

铜虫 (小有名气)
wuweibewin(金币+15, 博学EPI+1):谢谢回帖 参加讨论 2010-06-08 16:30:20
我感觉主要是浓度的问题，大了就成团了
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一条小路曲曲折折细又长，一直通向迷蒙朦的远方~~~~
3楼2010-06-07 19:27:41
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柳飞絮

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-06-07 20:45:57:

我也觉得是浓度问题！但是我从叶片研磨程度，到取材的量都有所提高（比上次以及一月份）当反而六管却都成那样了！哪有做何解释？

研磨程度增大DNA会不会发生断裂呢
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一条小路曲曲折折细又长，一直通向迷蒙朦的远方~~~~
8楼2010-06-07 20:52:04
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柳飞絮

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-06-08 16:28:42:

现在看来主要是纯度问题，溶解DNA时发现有大量变性蛋白混入！
估计是  1、抽提时过于小心，未抽提完全
       2 、抽提离心后吸液时，吸到了中间层
       3、利用离心的方法获得沉淀，会是一些杂质也混入
...

恭喜楼主实验成功，学习了
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一条小路曲曲折折细又长，一直通向迷蒙朦的远方~~~~
11楼2010-06-08 17:55:57
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