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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】请教：液相，洗脱问题？
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ynsfee

引用回帖:
Originally posted by 孤帆卡卡 at 2010-06-03 23:08:49:
PH4应该是在水中的等电点吧，8有可能是在这种流动相中的。你可以做个试验看看。希望有帮助

等电点还会有变化?

请教
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11楼2010-06-04 10:48:52
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xkp123

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“洗脱蛋白是一定是在等电点处洗脱能力最强"这是错误的，只能说在等电点容易保留，因为样品以中性分子的形式存在，更容易和固定相结合。至于在PH=8洗脱的峰面积最大，洗脱能力最强。是因为此时样品的离子化程度最大，越容易被洗脱，然而大于8时不好的原因是体系的离子强度大导致磷酸根和样品会竞争硅羟基，导致洗脱后峰面积小，小于8时不好的原因是样品不能充分的离子化。
仅是个人观点
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12楼2010-06-04 11:06:02
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ynsfee

引用回帖:
Originally posted by xkp123 at 2010-06-04 11:06:02:
“洗脱蛋白是一定是在等电点处洗脱能力最强"这是错误的，只能说在等电点容易保留，因为样品以中性分子的形式存在，更容易和固定相结合。至于在PH=8洗脱的峰面积最大，洗脱能力最强。是因为此时样品的离子化程 ...

我的柱子不是离子交换柱这个肯定，

也符合你说的机理吗
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13楼2010-06-04 17:24:49
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孤帆卡卡

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Originally posted by ynsfee at 2010-06-04 10:48:52:


等电点还会有变化?

请教

我的意思是PH4是在水中的溶解度最下，但在流动相中不一定也是4呀，你做个实验看看是不是这样，我并不确定
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冷药热药医不尽遍地炎凉
14楼2010-06-04 19:15:17
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xkp123

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Originally posted by ynsfee at 2010-06-04 17:24:49:


我的柱子不是离子交换柱这个肯定，

也符合你说的机理吗

复合啊，我不是铵离子交换的机理阐述的，你仔细看看，我们在讨论。
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15楼2010-06-04 21:47:19
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