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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电转化效率
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】电转化效率 已有3人参与

电转化大肠杆菌，转化的是DNA片段，电转杯是0.1的，条件是1500V，5ms，转了好多次都是失败，感受态制备时用10%的甘油1ml洗3次，转化时是先加5微升片段冰上放置5min，再加5微升再放5min，如何可以提高电转化的效率？先在这边谢过了！！
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上班族，学习ing……
1楼 2010-06-01 16:56:19
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小白兄

金虫 (小有名气)
★ ★
dhmdddd(金币+1):谢谢! 2010-06-01 19:30:11
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-06-02 22:36:19
我们实验室也是用的电转化，电压比你高1800V，一般我们是批量制感受态，放-80，转化时先冰上放置2-3min，质粒一般加1ul，连接产物转2ul，复苏1h，质粒一般涂1ul，连接产物看情况。我不知道你这里的DNA片段是没有环化的片段还是连接产物。你转化率低低到什么程度？
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时光如流水，匆匆而过。
2楼2010-06-01 18:27:34
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