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【求助/交流】测序信号弱 已有6人参与
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| 最近我的实验进行到测序阶段。第一次是自己用质粒抽提试剂盒抽提质粒寄出去测序的，测序公司反馈的结果是信号太弱，一个反应测到后面就全是杂峰了；第二次我把菌液寄出去测序，后面的结果页是一个反应都没侧全，后面的部分也都是杂峰。有没有人知道这个的问题出在哪？我要怎么重新改进之前的实验呢？ |
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lstt09nk(金币+3):感谢交流~~ 2010-05-31 19:03:58
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首先保证自己送出去的样品是单克隆 其次就是序列本身的问题了，测序公司网站上都会有关于杂峰、信号弱或者信号中断的说明。高GC含量，重复的A，都有可能导致问题。甚至一些表面看不出来有什么特殊的序列，也会因为实际产生二级结构的原因影响测序反应。如果测序出现了问题，最好能把自己已知的序列信息提供给测序公司，技术人员会根据他们的经验分析这个序列到底是什么情况，改进测序条件。他们一般都有针对不同类型序列的不同方案。提前通知他们样品的特殊序列有时候能减少不必要的时间浪费。 |
5楼2010-05-31 15:45:30
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