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terry098

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】薄层层析 柱层析已有10人参与

我现在要分离中药成分,我想问下怎样根据TLC板的展开剂来指导柱层析,TLC要走成什么样子的才能拿来做柱层析的洗脱剂,比如说RF值要走到多少?
从TLc的展开剂到变成柱层析的洗脱剂除了剂量变大,还有什么要做下变化呢?还有洗脱剂要达到多少量(ml)才能把样品走出来呢?这是走等度的柱层析,那么走梯度的柱层析,又要怎么调节薄层层析来指导做柱层析?薄层层析是等度的而柱层析是梯度的,洗脱剂要怎么变化呢?即每个梯度的量,和比例该怎么调节呢?
谢谢了
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匿名

用户注销 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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10楼2012-09-03 00:30:16
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tomuncle

金虫 (初入文坛)

★ ★
terry098(金币+1):谢谢参与
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-05-27 15:28:06
一般跑薄层时,第一个点的Rf值为0.1-0.2时,用此展开剂的溶剂条件跑柱子,洗脱大约2-5个柱体积就能够把它洗脱下来,跑第二个点时也要根据它的Rf值加大溶剂极性,或者粗分的话直接加大10%的比例即可。
3楼2010-05-27 15:25:14
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westzilch

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-05-27 18:27:16
当你的TLC上的样品Rf值在0.2左右时,此刻的洗脱剂比例基本恰好能将这个点从柱子上洗下来;
Rf大于0.2的点用比这个极性还小的洗脱剂就能洗脱下来;
Rf小于0.2的点需要再增大洗脱剂极性才能洗下来;
大致就是这样,不知道我说明白没~~~~
4楼2010-05-27 15:27:33
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wangyanan007

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-05-27 18:27:23
粗膏子点板不要太浓,以主要斑点为界砍断,具体条件可参考三楼和四楼的方法!这样就可以砍几个流份很容易后期分离~
6楼2010-05-27 18:20:35
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