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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么PCR产物第一次跑电泳有结果，第二次就什么也没有了
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yexiliu

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么PCR产物第一次跑电泳有结果，第二次就什么也没有了 已有11人参与

我今天提取的真菌的DNA，PCR扩增后，跑电泳，有目的条带，但是不清楚，我又跑一次，什么也没有了，连MARKER都有点模糊，这是怎么回事呢？
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一切皆有可能
1楼 2010-05-25 22:31:47
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★ ★
yexiliu(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):同意 2010-05-26 09:30:59
要是marker都不清楚就要看看是不是胶的问题了，或者电泳条件不合适。
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2楼2010-05-25 22:54:31
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nklyw

木虫 (正式写手)
★ ★
yexiliu(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):也许 2010-05-26 09:31:09
换电泳液吧或者胶不太好了吧
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3楼2010-05-25 23:06:14
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yexiliu

铜虫 (小有名气)
我都把重新做了一下胶，1%的胶，缓冲液都换了，可是，这是怎么回事呢
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一切皆有可能
4楼2010-05-25 23:25:13
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yexiliu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nklyw at 2010-05-25 23:06:14:
换电泳液吧或者胶不太好了吧

我都把重新做了一下胶，1%的胶，缓冲液都换了，可是，这是怎么回事呢
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一切皆有可能
5楼2010-05-25 23:26:13
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1214318xy

铁虫 (著名写手)
★ ★
yexiliu(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):同意 2010-05-26 09:31:25
我还真没遇到过，有可能被污染了吧。别想那么多了，重p吧，p的一般结果应该很亮的一条带的
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6楼2010-05-26 07:22:59
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姜大磊

木虫 (小有名气)
★ ★
yexiliu(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):支持 2010-05-26 09:31:39
正常。我也遇到这种情况。marke 要至少5ul。 建议再提取一次，重新pcr
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Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
7楼2010-05-26 07:24:18
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陈思容

铜虫 (正式写手)
★ ★
yexiliu(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):条件可以 2010-05-26 09:31:50
0.8%的胶，现在这天气，建议胶凝至少半小时。90V,30min左右
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8楼2010-05-26 08:46:35
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highpolmer

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也想知道到底为什么
？？？？？？？
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9楼2010-05-26 09:41:33
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
问题应该是在电泳条件上  marker 不可能 跑不出
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10楼2010-05-26 09:50:35
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