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Kirsten_hkm

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于PCR的问题已有10人参与

这是我在小木虫上的处女贴。。。
诚心请教一下大家,最近跑PCR结果让我很挫败!两星期前很稳定的条件突然什么都跑不出了,连引物二聚体也没有,请问一下大家可能是什么原因?
还有,有时候取PCR结果时发现液体都在管壁上,离心了才会下来,会是什么原因?会对结果又影响吗?
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笑西少

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2楼: Originally posted by lyg7720349 at 2010-05-23 15:17:14
对于不出结果的问题,估计是你的酶有问题或者操作失误
   对于第二问题:你可能加好混合物P之前没有离心吧。

应该不是离心的问题,我也P之前肯定离心的,但是管壁上还是有液滴。估计是盖子没有加热好
天然产物化学
17楼2014-06-12 18:47:46
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笑西少

银虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by hong303030 at 2010-05-23 16:05:11
可以试一下换一管新的酶再试一下,加入矿物油了吗?加了的话,应该不会蒸到管壁上吧,或者换一个PCR仪试一下,有可能是pcr仪热盖有问题,温度不稳定

我P之前离心了,也热盖了,但是P完了之后在PCR仪里面冷却到4度还是有液滴在管壁上。我还没有加过矿物油,请问矿物油具体是哪种啊?要加多少呢?谢谢!
天然产物化学
18楼2014-06-12 18:49:21
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7楼: Originally posted by Kirsten_hkm at 2010-05-23 16:44:36
好像是没有热盖,原来是这个原因。我再去试试。非常感谢!

我热盖后也是有液滴挂在管壁的,但是结果不受影响的啊
天然产物化学
19楼2014-06-12 18:50:53
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