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liushuai7333

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】间接E L I S A法如何测抗血清的效价? 已有3人参与

正在做间接竞争酶联免疫的实验,看文献要测自制抗血清的效价,有双向免疫扩散法和酶联免疫法,请问免疫扩散法如何测啊?最好详细点,谢谢
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richujs

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-05-22 10:19:57:
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726,免疫双扩散很简单的,
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板,将血清进行稀释,作为样本加入孔中,温育后加入一 ...

不同显色液吸收波长不一样,TMB显色液终止后用的是450nm
思想是能力和力量的源泉
6楼2010-05-23 09:05:46
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
liushuai7333(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2):热心虫友~~ 2010-05-22 14:08:18
liushuai7333(金币+9): 2010-05-22 15:13:39
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726,免疫双扩散很简单的,
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板,将血清进行稀释,作为样本加入孔中,温育后加入一定浓度的酶标二抗,温育后洗板,加底物显色,检测450NM的吸光度值,以吸光定值是空白值2倍的稀释度作为效价。
专注、专心、专业
2楼2010-05-22 10:19:57
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liushuai7333

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-05-22 10:19:57:
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726,免疫双扩散很简单的,
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板,将血清进行稀释,作为样本加入孔中,温育后加入一 ...

谢谢,你说的一定浓度是怎么确定的啊?看文献吗?还有效价的表示方法1:xxx是血清稀释度的意思吗?空白对照用正常的小鼠血清是吧,也和抗血清一样稀释相同的倍数吗?问题有点多,非常感谢你,没什么报答的,给些金币吧,以后有问题还望不吝赐教。再次感谢!
3楼2010-05-22 15:13:09
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-22 17:20:38
浓度主要根据分子大小以及经验,空白可以直接什么都不加,血清一般倍比稀释,说效价一定要说哪种方法测的才有意义。
专注、专心、专业
4楼2010-05-22 17:12:35
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