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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】间接E L I S A法如何测抗血清的效价？
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liushuai7333

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】间接E L I S A法如何测抗血清的效价？ 已有3人参与

正在做间接竞争酶联免疫的实验，看文献要测自制抗血清的效价，有双向免疫扩散法和酶联免疫法，请问免疫扩散法如何测啊?最好详细点，谢谢
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1楼 2010-05-22 09:43:44
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richujs

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-05-22 10:19:57:
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726，免疫双扩散很简单的，
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板，将血清进行稀释，作为样本加入孔中，温育后加入一 ...

不同显色液吸收波长不一样，TMB显色液终止后用的是450nm
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思想是能力和力量的源泉
6楼2010-05-23 09:05:46
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yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
liushuai7333(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2):热心虫友~~ 2010-05-22 14:08:18
liushuai7333(金币+9): 2010-05-22 15:13:39
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726，免疫双扩散很简单的，
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板，将血清进行稀释，作为样本加入孔中，温育后加入一定浓度的酶标二抗，温育后洗板，加底物显色，检测450NM的吸光度值，以吸光定值是空白值2倍的稀释度作为效价。
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专注、专心、专业
2楼2010-05-22 10:19:57
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liushuai7333

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-05-22 10:19:57:
给个网站去看下
http://jpk.hlju.edu.cn/reply.asp?id=26726，免疫双扩散很简单的，
还有你可以用间接ELISA法测效价
将抗原按一定浓度包被酶标板，将血清进行稀释，作为样本加入孔中，温育后加入一 ...

谢谢，你说的一定浓度是怎么确定的啊？看文献吗？还有效价的表示方法1：xxx是血清稀释度的意思吗？空白对照用正常的小鼠血清是吧，也和抗血清一样稀释相同的倍数吗？问题有点多，非常感谢你，没什么报答的，给些金币吧，以后有问题还望不吝赐教。再次感谢！
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3楼2010-05-22 15:13:09
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yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-22 17:20:38
浓度主要根据分子大小以及经验，空白可以直接什么都不加，血清一般倍比稀释，说效价一定要说哪种方法测的才有意义。
赞一下(2人) 回复此楼
专注、专心、专业
4楼2010-05-22 17:12:35
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