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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 【求助】HPLC中分离度不达标怎么办
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lxs111

[交流] 【求助】HPLC中分离度不达标怎么办 已有11人参与

HPLC中分离度不达标怎么办？如果达不到要求，只能改变标准中的哪些条件使之符合要求？
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1楼 2010-05-20 22:32:20
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yandouzi302

新虫 (初入文坛)
★
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-05-30 10:05:28
个人感觉，首先选择适合你要分离目标成分类别的色谱柱（填料差异很大），建议先用混合标准品试一下，如果标准品分离不理想，那么是柱子不适合你的这类成分分离。再次就是看标准品的他塔板数。如果标准品的峰形可以，但是峰比较宽，那么要考虑柱效原因。如果是峰型对称性不好，可以通过调节流动相PH值，加入缓冲盐改善。
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12楼2010-05-30 09:50:39
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)
★
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-21 08:40:34
分离度不达标一般说明柱效降低，解决方法就是更换新的色谱柱！亦或自己改良一下旧柱子，也可以暂时使柱效达标！！！
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......别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿；不见五陵豪杰墓，无花无酒锄作田！
2楼2010-05-20 23:35:50
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qingyue329

金虫 (小有名气)
★
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-05-22 16:15:17
分离度不达标，说明分离条件还不是特别合适吧；在修改一下梯度条件，加些弱酸弱碱试一下吧
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4楼2010-05-22 16:01:15
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蒙面礼服侠

木虫 (小有名气)
★
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-24 21:45:49
HPLC中分离度，没有具体情况不好分析呢
先看看柱子是不是合适的，长度和填料，如果是供试品成分太多的话，可以考虑使用长点的柱子
如果柱子没问题的话，就调节一下流动相比例，ph等，还有柱温和流速。
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6楼2010-05-24 20:54:00
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