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zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】aflp所用的变性胶用过滤吗? 已有4人参与

本人正在做AFLP试验,有两个问题想问一下,请有经验的虫子帮个忙:
        变性胶有没必要过滤?
        跑胶之前为什么要变性,片段单链和双链跑出来有什么区别吗?

[ Last edited by zhlq_mail on 2010-5-28 at 18:47 ]
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dixy2007

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-28 22:45:18
变性胶过滤稍微好些.否则胶里有些杂质.不过滤也能用,主要还看尿素里有没有杂质.
跑胶前变性可能与胶的性质有关.变性胶对单链的分辨率高些.
不知是否正确,还望高人指点.
2楼2010-05-23 23:43:23
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zhlq_mail

铜虫 (小有名气)

scelab:额。。。我直接给他奖励了,你下次发帖的时候记得设置金币就好。 2010-05-28 22:46:14
请版主用我的一个金币给这哥们:dixy2007
3楼2010-05-28 18:48:19
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zzh888

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩,要经过过滤的,除去其中的杂质,过滤后透明为好
4楼2010-06-01 15:52:52
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要过滤

尤其是用TBE作缓冲液的话,可能会有沉淀。尿素浓度也很大,室温的变化也有可能导致尿素析出

胶很薄,一点点沉淀都有可能影响电泳。

胶是变性胶,样品上样之前当然也要变性了,总不能让核酸在跑的时候慢慢变性吧,那跑出来成什么样了。。。。。。。。。。。。
5楼2010-06-01 16:03:15
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