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redking

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【分享】PCR总是没有结果呢已有3人参与

我是一名刚进实验室的新手，做的是食源性耐药菌，检测其中的耐药基因，最近做了很多次都没有结果，PCR 产物只有引物二聚体，连阳性对照都没有，之前阳性对照能出来，请高人指点下了

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1楼 2010-05-18 00:31:37

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redking

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by cqyniu at 2010-05-18 08:44:51:
引物换了没有呢

我的引物借给我师妹用，她都能扩出来，那就说明引物没有问题啊

5楼2010-05-18 15:57:30

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chengkun

金虫 (正式写手)

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0.25

是不是模板降解了？可以重新制备一次模板试试

3楼2010-05-18 09:16:53

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hyde0706

木虫 (正式写手)

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scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:22:38

首先，这个基因是保守的吗？别人能做出来，用的和你是相同的模板吗？其次，PCR扩增有很多关键因素，最重要的就是引物和模板，遇到问题首先从这两个地方入手。
祝实验顺利！

赞一下(2人)

6楼2010-05-18 20:39:36

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虫虫博士

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scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:22:48

去想别人学习一下，怎么做PCR反应，特别是加样顺序，那些先加，那些后加，PCR程序也让别人给你设好。一开始不要急躁，慢慢来吧！感觉是你操作的问题！！

赞一下(2人)

7楼2010-05-18 21:04:06

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