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redking

新虫 (初入文坛)

[交流] 【分享】PCR总是没有结果呢 已有3人参与

我是一名刚进实验室的新手,做的是食源性耐药菌,检测其中的耐药基因,最近做了很多次都没有结果,PCR 产物只有引物二聚体,连阳性对照都没有,之前阳性对照能出来,请高人指点下了
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redking

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by cqyniu at 2010-05-18 08:44:51:
引物换了没有呢

我的引物借给我师妹用,她都能扩出来,那就说明引物没有问题啊
5楼2010-05-18 15:57:30
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chengkun

金虫 (正式写手)

0.25

是不是模板降解了?可以重新制备一次模板试试
3楼2010-05-18 09:16:53
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hyde0706

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-18 22:22:38
首先,这个基因是保守的吗?别人能做出来,用的和你是相同的模板吗?其次,PCR扩增有很多关键因素,最重要的就是引物和模板,遇到问题首先从这两个地方入手。
祝实验顺利!
6楼2010-05-18 20:39:36
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虫虫博士

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-18 22:22:48
去想别人学习一下,怎么做PCR反应,特别是加样顺序,那些先加,那些后加,PCR程序也让别人给你设好。一开始不要急躁,慢慢来吧!感觉是你操作的问题!!
7楼2010-05-18 21:04:06
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