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fly9081

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教,SDS-PAGE的问题 已有11人参与

跑SDS-PAGE之前,蛋白要进行变性,但在之前的一些步骤中,(如若采取超声破碎,)都要防止蛋白变性,为什么?谢谢大家!
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段家一凡

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by fly9081 at 2010-05-17 21:37:47:
跑SDS-PAGE之前,蛋白要进行变性,但在之前的一些步骤中,(如若采取超声破碎,)都要防止蛋白变性,为什么?谢谢大家!

超声破壁会产生热量,如果不冰浴的话,就会变性,如果你只是看看蛋白有无表达,变不变性就无所谓了,但如果你需要有活性的蛋白,变性就不行了。
8楼2010-05-18 00:40:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
木有吧,超声你说的是冰浴?那个是怕蛋白酶
2楼2010-05-17 21:39:53
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zhjun84

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跑SDS-PAGE之前,蛋白要进行变性,但在之前的一些步骤中,(如若采取超声破碎,)都要防止蛋白变性,为什么?谢谢大家


前面主要是分离蛋白,后面跑胶 需要 和sds结合
3楼2010-05-17 22:04:27
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

电泳目的首先要搞清楚!!!电泳一般来说是为了坚定实验结果,所以即使蛋白质变形了也没事,但是你要提取纯化蛋白质那就不一样了!!!大多数情况下电泳只是一种检测、坚定的手段!所以会不一样!!!
大家共同交流、共同提高!!!
4楼2010-05-17 23:28:32
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