24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1622  |  回复: 19

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-05-17 20:58:27:
没扩出来~

第一个是引物二聚体~
第二个你的胶倒厚一点,电压低一点

试试

1500左右
11楼2010-05-18 09:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 小白兄 at 2010-05-17 21:38:33:
你的marker跑的没有问题,之所以有点斜是由于电泳时的边缘效应。你全没P出来,那有很多原因。你扩增的片段是多大?过大的话也有可能扩不出来。还建议你下次做的时候加个阳性对照。

之前p过纯菌的 效果挺好 这是从土样中提取 细菌群落总基因后p的两次 总基因组也做过电泳检测效果比较好
12楼2010-05-18 09:44:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by gaiyf at 2010-05-17 22:55:46:
首先你提完DNA后检测了没有?像上面的情况有两种,一是dna没有提出来,二是模板的量太大,所以建议先检测DNA的提取情况,若是很亮,就将模板稀释了以后再扩。

DNA提取后电泳检测了 挺好,模板也经过稀释 ,有稀释10倍也有稀释50倍
13楼2010-05-18 09:45:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaiyf

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那就在稀释到100倍试试吧
多看文献,多学知识
14楼2010-05-18 09:48:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by gaiyf at 2010-05-18 09:48:09:
那就在稀释到100倍试试吧

我也想这么试试 ,因为土壤里面杂质比较多,影响pcr过程中酶的作用以及引物与模板的结合 所以 ~~
15楼2010-05-18 09:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没P出条带来,建议你下次做的时候一定要加个阳性对照。
16楼2010-05-18 11:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaiyf

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那不知你是用什么方法提的DNA,建议还是花点钱买个个试剂盒提吧,那样会更好一些
多看文献,多学知识
17楼2010-05-18 12:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by gaiyf at 2010-05-18 12:17:12:
那不知你是用什么方法提的DNA,建议还是花点钱买个个试剂盒提吧,那样会更好一些

据说试剂盒提出来的基因组比较纯净 但是同时也是在表明基因组有的丢失了 跟我们做的有点违背
18楼2010-05-18 14:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwling

铜虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
感觉第一张图除了引物二聚体还有别的 我也碰到过这种情况 将退火温度弄高点试试 另外 DNA可以再纯化下试试
19楼2010-05-18 22:59:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

这个问题还没有解决啊 各位赶紧显现自己的神通吧 帮帮小弟过了此关~~
20楼2010-05-21 13:07:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 老夏853 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见