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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】问大家一个设计引物对阅读框的问题
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snowice

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】问大家一个设计引物对阅读框的问题 已有3人参与

我现在要把一段基因（带ATG和终止密码子）连在pRSET-C表达载体MCS里面，想获得带6xHis的融合蛋白，6xHis在MCS上游，设计引物时对了正向引物的阅读框，加了两个碱基让基因正确从ATG开始读，但反向引物设计时没对阅读框，1.这样是否对融合表达有影响；2.对下游的氨苄抗性表达是否有影响呢？该载体自带T7启动子和T7 transcription terminator。
http://www.pharmon.com.cn/product/show.asp?id=352918  上面有pRSET-C的简略图谱，谢谢各位啦
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爱吃爱睡懒得要死的猪头
1楼 2010-05-12 00:06:55
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
检查正向的阅读框即可，，要求能够从HIS6一直读到你 基因的结束

[ Last edited by gastrodia on 2010-5-12 at 08:14 ]
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3楼2010-05-12 08:13:19
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有影响，检定完毕
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-12 03:54:24
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snowice

银虫 (小有名气)
谢谢各位，只是转了好几次板上什么都没有，害怕是没对下游阅读框影响ap的抗性了
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爱吃爱睡懒得要死的猪头
4楼2010-05-12 11:43:45
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