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犹寒

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2010-05-04 21:27:58:
一般的转化实验,自己做感受态,
一次起码可以做个50支,TSS法做,很省事,干嘛要买?

这50支,起码可以买一把中等质量的移液枪了。
我不建议去买小公司的感受态。

我们实验室还是买Invitrogen/Novagen等 ...

我觉得这个还可以省钱,就是不知道具体的培养过程。。。
11楼2010-05-07 20:54:25
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


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一般的话做感受态是用Cacl2法处理。。。效果还不错
12楼2010-05-07 21:14:25
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huaq1984

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
感受态自己做就可以了,买的太贵了,分子克隆上有感受态的制备方法。
买的可以直接用
13楼2010-05-07 23:11:59
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nklyw

木虫 (正式写手)


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感受态细胞还是很好做的
14楼2010-05-07 23:22:41
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huaq1984

银虫 (初入文坛)


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用TSS法,氯化钙法制备感受态,分子克隆书上有,你可以看看
15楼2010-05-08 22:19:34
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
实验室一直自己做的感受态,存-80°,慢慢用
不过做完要做转化效率检测,一般生手做的质量都有待提高
现在实验室有专门的技术员负责制作感受态,转化效率很不错

如果不是做克隆用只是转个质粒之类的,那么对效率要求也就没那么高

另买的感受态一支分成3到5支用也可以,不过得一次分好冻存,反复冻融非常不好

[ Last edited by zjzz on 2010-5-9 at 03:42 ]
终于熬成木虫了……
16楼2010-05-09 03:40:57
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xclj369ouc

金虫 (小有名气)


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一般的转化实验用买的感受态很不划算的。除非你需要比较特殊的感受态菌株。
我们实验室的感受态细胞都是自己做的。我们做的也是DH5α感受态。
从生工买的菌株,比较便宜的。摇菌复苏后,可以做很多管感受态,很好用的。
我们的做法主要是参照 Gene Clone III 中氯化钙法来制备。
17楼2010-05-09 11:59:54
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loxuehuve

铜虫 (小有名气)


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可以自己做 也可以直接用 呵呵
18楼2010-05-12 15:25:58
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欣如止水

金虫 (小有名气)


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我还没用过直接买来的感受态呢,这么方便啊。
19楼2010-05-12 17:08:05
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