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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】感受态细胞的制备
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犹寒

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2010-05-04 21:27:58:
一般的转化实验，自己做感受态，
一次起码可以做个50支，TSS法做，很省事，干嘛要买？

这50支，起码可以买一把中等质量的移液枪了。
我不建议去买小公司的感受态。

我们实验室还是买Invitrogen/Novagen等 ...

我觉得这个还可以省钱，就是不知道具体的培养过程。。。
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11楼2010-05-07 20:54:25
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般的话做感受态是用Cacl2法处理。。。效果还不错
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12楼2010-05-07 21:14:25
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huaq1984

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
感受态自己做就可以了，买的太贵了，分子克隆上有感受态的制备方法。
买的可以直接用
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13楼2010-05-07 23:11:59
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nklyw

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
感受态细胞还是很好做的
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14楼2010-05-07 23:22:41
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huaq1984

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用TSS法，氯化钙法制备感受态，分子克隆书上有，你可以看看
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15楼2010-05-08 22:19:34
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
实验室一直自己做的感受态，存-80°，慢慢用
不过做完要做转化效率检测，一般生手做的质量都有待提高
现在实验室有专门的技术员负责制作感受态，转化效率很不错

如果不是做克隆用只是转个质粒之类的，那么对效率要求也就没那么高

另买的感受态一支分成3到5支用也可以，不过得一次分好冻存，反复冻融非常不好

[ Last edited by zjzz on 2010-5-9 at 03:42 ]
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终于熬成木虫了……
16楼2010-05-09 03:40:57
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xclj369ouc

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般的转化实验用买的感受态很不划算的。除非你需要比较特殊的感受态菌株。
我们实验室的感受态细胞都是自己做的。我们做的也是DH5α感受态。
从生工买的菌株，比较便宜的。摇菌复苏后，可以做很多管感受态，很好用的。
我们的做法主要是参照 Gene Clone III 中氯化钙法来制备。
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17楼2010-05-09 11:59:54
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loxuehuve

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以自己做 也可以直接用 呵呵
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18楼2010-05-12 15:25:58
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欣如止水

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我还没用过直接买来的感受态呢，这么方便啊。
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19楼2010-05-12 17:08:05
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