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hall1998木虫 (小有名气)
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【求助】硅纳米粒子洗涤及连接 已有3人参与
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各位大家好。我最近用反相微乳（油包水）制备了直径在30-40nm的二氧化硅纳米粒子，TEM显示是球形的。但是，最近发现了一个问题，就是在用丙酮破乳后，再用乙醇第一次洗涤的时候，离心后发现沉淀由白色变成了透明的，但是一超声后，由变成白色悬浮液，请问这是怎么回事啊？？ 再一问题就是，二氧化硅纳米粒子（合成同上法，表面氨基修饰）与DNA的连接问题，我用的是EDC/NHS连接氨基修饰的DNA。做法如下：首先氨基修饰的NP悬浮在含有10%琥珀酸酐的DMF中，以使NP氨基转化为羧基，离心洗涤后，用加入EDC/NHS，以及氨基DNA连接反应3h。PS：EDC、NHS是新买的，DNA合成了2次。但是就是连不上。都连了几个月了。请各位一定要帮帮我啊。 谢谢大家！ |
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hall1998
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6楼2010-04-29 11:16:59
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2楼2010-04-29 10:08:25
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NP氨基含量用荧光胺进行了测定，有很强的荧光出现。在用琥珀酸酐处理后，再用荧光胺进行了测定，这个时候，几乎没有荧光出现。 配方是：环己烷 7.5ml，正己醇 1.8ml，TX-100 1.77ml，20min后，加入水相480ul（水400ul+80ul 水溶性染料）反应30min后，再加入100ul TEOS,60ul 氨水，反应24h后，加入TEOS 50ul，APTES 20ul 反应24。 用丙酮破乳后（沉淀是白色），沉淀用无水乙醇洗涤（离心后的沉淀是透明），用水洗涤，（悬浮液放置一段时间后再离心，此时的沉淀有可能变成白色）。 在进行DNA连接时，会用到乙醇处理，所以每次处理后，都变成了透明的沉淀。 另外，DNA与NP连接，各位有好的经验和技巧的，请给予指点，小弟我在这个问题已经折腾了快一年了。求各位了！！！！！！ |
3楼2010-04-29 10:30:11
hall1998
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