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木虫 (小有名气)

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专业: 生物化学与分子生物学

[交流] 【求助/交流】SP柱子纯化蛋白，蛋白结合后，用2M NacL都没有洗脱下来，该怎么办？已有4人参与

>有一蛋白蛋白等电点6.8,一开始在PH=4.0的溶液中，现在遇到一个问题，用B相（100%），NaCL的浓度都达到2 M了，洗脱下一部分蛋白，但是从上样的蛋白量来看，蛋白都已经挂柱子了，穿透里面没有蛋白，但是洗脱下来的蛋白蛮少，断定很多蛋白还是挂在柱子上的，现在要用什么方法把其余的蛋白洗脱下来呢？

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1楼2010-04-28 19:06:38

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金奇橙

金虫 (小有名气)

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专业: 临床检验新技术

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-04 12:28

SP柱结合力太强，大部分结合到柱上，是洗不下来的，一般我们都不太爱用，都用弱的CM柱或别的，用NAOH或HCL应该能洗下来，但有活性要求的就算洗下来也没用了

赞一下(2人)

5楼2010-05-04 11:18:21

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