| 查看: 2337 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
泡泡9706银虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】离子交换层析 已有4人参与
|
||
| 我异源表达的目的蛋白等电点预测为9，粗酶液上阴离子交换柱，用ph 7.5的缓冲液，目的蛋白在穿透峰里。我想换用阳离子交换柱，可是用了20mM ph 5的醋酸缓冲液，ph 7的磷酸缓冲液，所有的蛋白都不挂柱，都在穿透峰里，试了好多柱子，强阳的，弱阳的，预装的，自己装的，都是这个情况，想请教高手，会是什么原因呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有227人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 离子交换层析求助
已经有12人回复
- 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位
已经有15人回复
- 离子交换层析（deae-纤维素）出峰差异很大（有图谱）
已经有26人回复
- 【分享】怎样选择离子交换填料
已经有6人回复
- 【求助/交流】离子交换层析怎么选择pH?
已经有4人回复
- 【求助】请问阳离子交换层析柱如何清洗
已经有11人回复
泡泡9706
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.1
- 帖子: 130
- 在线: 21.7小时
- 虫号: 601036
- 注册: 2008-09-12
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2010-04-29 14:17:05
your2007
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 22507.1
- 红花: 8
- 帖子: 2517
- 在线: 324.4小时
- 虫号: 710330
- 注册: 2009-02-27
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2010-04-28 19:46:32
月月大可
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★ ★ ★
泡泡9706(金币+1): 2010-04-29 14:15
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-30 15:52
泡泡9706(金币+1): 2010-04-29 14:15
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-30 15:52
|
偶的蛋白预测PI为8.8-9.0，最初的时候高聚不挂柱，后来想办法解聚了。在pH6.5的MES中挂在Resource S柱上，纯化的效果还是不错的。 考虑你的蛋白是不是也是高聚状态，如果是的话不挂柱也正常了。有几个半胱氨酸？有的话要加入β-巯基乙醇或者DTT，防止形成错误的二硫键；是否结合底物会有较强的构象改变，如果是可以考虑加入底物，稳定结构。 多对你蛋白的性质进行了解，然后尝试。 有填料建议使用小柱子做预实验。 |
3楼2010-04-29 12:15:32
泡泡9706
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.1
- 帖子: 130
- 在线: 21.7小时
- 虫号: 601036
- 注册: 2008-09-12
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
4楼2010-04-29 14:13:48
