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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助DNA模板问题
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shengwufenzi at 2010-04-24 22:17:32:
尤其是那白色的长长的背景，主要是蛋白啊，你没除净

蛋白跑的那么快，都说蛋白会留在点样孔那里的呀
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11楼2010-04-25 09:44:26
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
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scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-26 17:14
质量还可以，我看旁边的Maker有带拖尾，建议用浓度大点的胶跑下，应该可以看到基因组DNA的主带。
蛋白应该在点样孔里，很难跑出来，所以应该不存在蛋白背景的问题。
后面长长的弥散应该是RNA,建议用RNase处理下。
总体来说，能看到比较完整的基因组DNA的带，当模板应该没问题。
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Thank-you，so-blue.
12楼2010-04-25 11:21:25
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馨沁

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
裂解时间不宜过长
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13楼2010-04-25 11:44:19
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zhixuec

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-26 17:14
引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-04-24 22:04:37:



这是我提的小麦叶片的基因组DNA，跑胶后如上图，请高手分析分析。



中间是

原因有：

1.点样孔有白色残留是蛋白质没除尽

2.样品DNA呈现smear状表示被降解了，或者是机械震断  因此动作要轻柔  建议重提，再纯化已经没用了

3.λDNA/Hind3  有拖尾说明琼脂糖凝胶没制好
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酷爱の族
14楼2010-04-25 12:31:17
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zhixuec

木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-04-25 09:44:26:


蛋白跑的那么快，都说蛋白会留在点样孔那里的呀

蛋白质的分子量较大，不会跑出点样孔的
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酷爱の族
15楼2010-04-25 12:33:55
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lliuzhi

金虫 (正式写手)
★
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DNA降解成小片段了，还有蛋白没除干净，用蛋白酶消化过了吗？
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16楼2010-04-26 14:44:01
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lliuzhi at 2010-04-26 14:44:01:
DNA降解成小片段了，还有蛋白没除干净，用蛋白酶消化过了吗？

没有用蛋白酶消化，也没有用RNA酶消化RNA
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17楼2010-04-26 16:49:29
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