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xpb2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by shengwufenzi at 2010-04-24 22:17:32:
尤其是那白色的长长的背景,主要是蛋白啊,你没除净

蛋白跑的那么快,都说蛋白会留在点样孔那里的呀
11楼2010-04-25 09:44:26
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

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scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-26 17:14
质量还可以,我看旁边的Maker有带拖尾,建议用浓度大点的胶跑下,应该可以看到基因组DNA的主带。
蛋白应该在点样孔里,很难跑出来,所以应该不存在蛋白背景的问题。
后面长长的弥散应该是RNA,建议用RNase处理下。
总体来说,能看到比较完整的基因组DNA的带,当模板应该没问题。
Thank-you,so-blue.
12楼2010-04-25 11:21:25
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馨沁

木虫 (小有名气)


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裂解时间不宜过长
13楼2010-04-25 11:44:19
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zhixuec

木虫 (著名写手)

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引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-04-24 22:04:37:



这是我提的小麦叶片的基因组DNA,跑胶后如上图,请高手分析分析。



中间是

原因有:

1.点样孔有白色残留是蛋白质没除尽

2.样品DNA呈现smear状表示被降解了,或者是机械震断  因此动作要轻柔  建议重提,再纯化已经没用了

3.λDNA/Hind3  有拖尾说明琼脂糖凝胶没制好
酷爱の族
14楼2010-04-25 12:31:17
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zhixuec

木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-04-25 09:44:26:


蛋白跑的那么快,都说蛋白会留在点样孔那里的呀

蛋白质的分子量较大,不会跑出点样孔的
酷爱の族
15楼2010-04-25 12:33:55
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lliuzhi

金虫 (正式写手)


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DNA降解成小片段了,还有蛋白没除干净,用蛋白酶消化过了吗?
16楼2010-04-26 14:44:01
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xpb2005

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lliuzhi at 2010-04-26 14:44:01:
DNA降解成小片段了,还有蛋白没除干净,用蛋白酶消化过了吗?

没有用蛋白酶消化,也没有用RNA酶消化RNA
17楼2010-04-26 16:49:29
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