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695木虫 (职业作家)
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【求助/交流】western blot求救(已更新） 已有6人参与
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各位好，最近在做原核表达，原核表达的是含GST的融合目的蛋白（98kD）,湿转1个小时，TBST+5%Milk封闭1-2个小时，1抗GST（sigma）在TBST+0.5%milk4度摇床过夜，然后清洗三次，2抗在室温TBST+0.5%milk1.5-2个多小时，然后TBST 洗脱3次，用SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate显色，结果显出来的带跟我胶上的条带几乎完全一致，这可能是什么原因呢？抗体都是1：2500稀释的。多谢各位指点，第一次接触，谢谢了 [ Last edited by 695 on 2010-4-24 at 05:19 ] |
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