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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】菌种长期保存方法
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-20 14:32:08:
我们一般就是加甘油，到甘油终浓度15%，保存在-80度冰箱，-20度和4度还真是不知道该怎么办，以前商业的细胞放在-20度都死了

大概能保存多长时间？
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11楼2010-04-20 19:26:17
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zouting at 2010-04-20 17:17:51:
-20一般只能放几个月，我们一般放三个月就活化一次，长期保存时用10%甘油-80保存

xiexie!
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12楼2010-04-20 19:27:58
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czhsr1123

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
-20的方几个月没事，半年以上的就-80或者-70，后者省电些
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13楼2010-04-20 22:10:12
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
给你讲讲一般药厂的菌种保藏吧，很省钱的哦，也符合药监局检查时的标准。

药厂一般用到大肠杆菌，金葡菌，黑曲霉，白色念珠球菌，生孢梭菌，枯草芽孢等，我们的目的是保藏一年，标准是买进时是第二代，使用时不超过第五代。

方法：普通冰箱0度一下冷藏。先把买回来的二代菌在相应的培养基中培养分离，观察菌落形态和做革兰氏染色，确定是我们所需要的菌后，再事先准备好半固体琼脂小管，接着用接种环挑取菌落穿刺接种于琼脂的斜面及高层，然后在覆盖上事先准备好的灭过菌并干燥过的液体石蜡，约1CM。就可以冷藏了，有效期一年。

一般是制备12支，然后要用时在取出一支活化后划线接种于琼脂斜面，培养24小时候，冷藏在冰箱里，有效期一月，这个制备4支。这样就能保证每周都有菌用了，使用时是第四代或第五代。
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今夜的寂寞，让我如此美丽。
14楼2010-04-21 14:24:28
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