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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】硅胶薄层层析与柱层析结果分析?已有7人参与

各位虫友,我的实验结果如下:硅胶薄层层析采用正己烷:乙酸乙酯:甲醇=3:1:1展开如图1所示,于是我采用硅胶柱层析,柱高7cm,直径1.5cm,洗脱剂为展开剂,每个试管收集10ml,浓缩后,点薄层层析板,结果见图2,大家帮忙分析一下?以此展开剂作洗脱剂是否合适?现在还不知道,哪个斑点是我所需要的。通过分析,第一管就有斑点,第5、6管出现2个斑点,共收集了10管,11和12为上样样品,大家分析一下,这样的结果说明了什么?我又做了加入乙酸的实验,如图3所示,(所点的样品都是相同的)标有5%,10%为展开剂中加入了5%和10%乙酸后薄层层析后的结果,0表示不加入乙酸,大家看一下,用加有乙酸的展开剂作洗脱剂是否可以?
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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

还有个问题,各位虫友,在TLC上的一个点能否说明该点为一种物质,还是多种物质的混合物?
2楼2010-04-20 08:36:03
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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

各位虫友,帮忙分析一下
3楼2010-04-22 22:26:55
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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by pdw_david at 2010-04-22 23:41:59:
首先想说的是依你所示的板层结构,用展开剂当洗脱剂是不可能分开的.因为大致看来你的体系中有5个点,以200-300目的硅胶柱为例,当TLC中的点Rf=0.5时一般就可认为:用展开剂作洗脱剂就可很快将此点洗脱下来.(你可以将柱 ...

多谢您的分析与指教。根据您得意见,我继续作了实验。柱子与原来相同,洗脱剂我用了三种,连续洗脱,每管20ml,先用6:1:1体系装柱和洗脱10倍体积(结果如图6;1;1)

然后用3:1:1洗脱10倍体积(结果如图3;1;1 )

再用1:1:1体系洗脱8倍体积(结果如图1;1;1)

分别进行点样TLC展开,展开剂为3:1:1,如图所示。出现的结果令人头痛,6:1:1的第一管还是有,以后各管均有;3:1:1也是隐约可见斑点;而1:1:1的更是多,这个怎么分析呀?难道成分就这么复杂?

[ Last edited by qingdaobo on 2010-4-23 at 08:55 ]
5楼2010-04-23 08:52:53
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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

实验进行中,请虫友指点迷津
6楼2010-04-23 14:18:01
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qingdaobo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by pdw_david at 2010-04-23 16:36:53:
可能是我昨天没说清楚,在装柱子的时候,无论是干法还是湿法,所用来浸润柱子的溶剂都应该是混合溶剂中极性最小的(仅对正相柱层析,如果是反相柱则正好相反),所以你用6:1:1浸润肯定不行.应该用正己烷浸润.
此外,我想 ...

多谢指点,您的建议是我茅塞顿开,我会进一步试验的,看看能够分开
9楼2010-04-24 08:21:21
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