应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】克隆5k片段
51/1返回列表
查看: 1357  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

along8998

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】克隆5k片段 已有8人参与

各位大侠好，我要克隆一个5k左右的片段，GORK基因，现在犹豫不知道直接克隆还是分段克隆好，不知哪个大侠做过类似的长序列克隆，希望能给小弟一些指点和建议。
非常感谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
呵呵
1楼 2010-04-16 18:27:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
建议分段做，一次做突变多，到时候更麻烦～
赞一下 回复此楼
8楼2010-04-30 10:11:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

风中摇曳

木虫 (正式写手)

热爱科学
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-16 22:03
你可以用TAKARA公司的LA taq酶，它能扩增长片段，建议不要用普通的taq酶扩增。我最近刚通过LA taq酶得到一个4K左右的片段。
赞一下(1人) 回复此楼
scienceisnature
2楼2010-04-16 22:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zrm1983

银虫 (小有名气)
★ ★
lstt09nk(金币+2):欢迎交流~~ 2010-04-17 19:22
楼上的方法可以，takara的LAtaq酶挺好用的，我克隆过12K的片段，不过要注意选一个扩增长片段稳定的PCR仪，那样效果比较好。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-04-17 09:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)
建议先分两段扩增，然后再做overlap PCR
赞一下 回复此楼
4楼2010-04-17 11:54:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭