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yusuya

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教XhoI与EcoRI双酶切问题已有6人参与

本人用pDsRed-Monomer-C1质粒用XhoI与EcoRI双酶切后,想连接一段目的基因,可是总是连接不上,而且一直是自连,CAGATC‘TCGA’GCTCAAGCTTCG‘AATT’CT
                                                            GTCTAG‘AGCT’CGAGTTCGAAGC‘TTAA’GA
                                                                         XhoI                             EcoRI   
希望高人指点下都什么原因会造成自连呢?两个酶切的位点很近是不是会造成影响呢?
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j2

木虫 (正式写手)

yusuya(金币+1): 2010-04-15 21:25
这2种酶是不是可以用同一缓冲液的
可以的话,一般双酶切的酶用量在5-10倍,酶切会比较完全
修炼ing,当虫仙……
6楼2010-04-15 19:20:08
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