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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助 PCR空白总是有条带
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)
★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
既然其他条件没啥问题，可能是你的电泳系统有问题，导致了小部分DNA的移动方向有问题，你换下电泳装置试试。
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望大家都各有所获！
11楼2010-04-06 10:36:00
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★ ★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-06 19:48
Taq酶也有可能污染的，我又一次就是pcr对照总有条带，后来逐个排查发现是酶的问题
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12楼2010-04-06 16:24:11
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nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜
★ ★ ★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-06 19:48
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-06 19:48
PCR反应体系配制的时候  最好
第一个先做空白的
感觉还是污染
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湖深而静溪浅而鸣
13楼2010-04-06 17:22:39
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mlcrazy9596

金虫 (小有名气)
我用的是天根的MIX，哎。。。。
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14楼2010-04-06 19:04:37
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
scelab(金币+2):韩国西海研究所的MM也是专家:tiger29:谢谢交流！:tiger06::tiger28: 2010-04-06 19:55
引用回帖:
Originally posted by huangqihong at 2010-04-06 10:28:21:
就像上面各位说的，可能受污染了，而且因素很多，另外是不是电泳时点样的问题？我看你的样品亮度很高，会不会是点样时旁边的样品过多溢过去的，才造成空白的那条浅带？

对啊，这个很有道理，前面的亮度很大，后面的不换枪头，冲洗不净，都会是这个样子

电泳漂移也不是没有可能，所以把空白点到Marker后面

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-6 at 19:53 ]
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15楼2010-04-06 19:51:43
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
mlcrazy9596(金币+1): 2010-04-06 20:21
引用回帖:
Originally posted by nankou2008 at 2010-04-06 17:22:39:
PCR反应体系配制的时候  最好
第一个先做空白的
感觉还是污染

第一个做空白是不科学的，空白一定要在最后，不过可以先做一个空白，最后再做一个空白，这样就可以检测你的操作是否会引入污染
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16楼2010-04-06 19:54:40
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nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-06 19:54:40:


第一个做空白是不科学的，空白一定要在最后，不过可以先做一个空白，最后再做一个空白，这样就可以检测你的操作是否会引入污染

第一个先做空白就可以排除是不是在后面操作过程中有没有污染的啊！楼主不就是遇到这样的问题了么？如果第一个先做的空白样品是阴性的，结果最后一个再做的空白是阳性的，那我觉得操作过程中是污染造成的几率就很大了。
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湖深而静溪浅而鸣
17楼2010-04-06 21:09:00
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
楼主，你看看用10%次氯酸钠擦拭所有操作环境和工具设备后再进行试验，结果好不好。
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不忘初心，为梦远行。
18楼2010-04-07 11:38:29
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