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menglongkafei铜虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】请教发卡DNA的问题
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请问发卡DNA发卡环打开后，想把它再回到原来的发卡形式，还原到发卡形式时的条件是什么？ 比如温度、时间 盐度 及应注意一的事项是什么 |
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2楼2010-03-17 18:23:02
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menglongkafei(金币+5): 2010-03-18 10:37
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我用的是单链发卡DNA，一段修饰的有二茂铁，另一端修饰在电极表面，不知，发卡环有21个，颈有6对， 不知这样的如果跟互补的杂化后，将互补链去掉后，剩下的这个线性的发卡式DNA要恢复到发卡式如何处理？ 似乎这个问题在哪里见过 这么看来，探针（就是你的发夹DNA）似乎不是游离的，而是所谓的固定化的，所以不存在探针之间形成dimer的问题 这种情况是很理想的，只要充分洗脱外源杂交链（似乎是高盐洗？我忘了是不是高盐可以破坏氢键），然后加热到6对互补碱基融解温度（其实是半数解链，一般软件或者公式算出来的Tm）再高个5度左右，然后降温即可。我可以让其自然冷却至室温都没问题。骤冷不一定需要，看你的选择。 还是发上来交流好，似乎之前也有人问过类似的问题 |
3楼2010-03-17 22:20:42