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刘仕博

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】为什么两次PCR的结果差这么多?

前后做了两次荧光定量PCR。这两次用的样品是分两次处理的,但处理的方法是一样的。所以理想状态下,两次PCR的结果应该是一样的,就算不一样也应该差的不多吧。但吓人的是,如果空白的值是1的话,第一次的结果大约是2到3,而第二次的结果大约是0.0~0.4,这两次实验用的空白也是分开处理的。不知道哪位高手给解释下~
先谢啦!
对刚才忘了个事情,第一次提取RNA的时候提取完了就直接用了。第二次因为260/280的值不是很理想,所以就纯化了下,会不会是这个原因呢?
还有就是我的actin的溶解曲线不是很好,不过我感觉不会对结果造成这么大的影响。。。

[ Last edited by 刘仕博 on 2010-2-9 at 18:25 ]
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生命在于折腾~
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yang0071

木虫 (职业作家)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-02-09 22:04
RNA纯化步骤出了问题可能
RNA本身就很容易降解
4楼2010-02-09 19:21:52
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