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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 【求助】液相求助：梯度洗脱会出鬼峰
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lzh1220

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相求助：梯度洗脱会出鬼峰 已有7人参与

安捷伦快速液相，乙腈-水 0~30min，乙腈5%~100%，样品为标准品，摸条件跑了几批图谱后，发现在相同时间有同一组峰出现，且确定不是标准品峰，然后进空白溶剂、进样量设为0μL均有相同峰，工程师来了怀疑污染，清洗进样系统后，仍出现同样问题。不接柱试验，发现没有峰，下结论我们的柱子污染，可是我们换了5根柱子（4根正常使用中，1根新的），都出现该现象。我们猜想是梯度引起。现将问题拿出来，请教大家，希望高人指点下。
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1楼 2010-01-30 01:11:24
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tpmwq

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也出现了类似这样的问题
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2楼2010-01-30 10:44:03
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lzh1220

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by tpmwq at 2010-01-30 10:44:03:
我也出现了类似这样的问题

我们实验室四台液相，貌似就这一台严重些，是不是机器的问题呢？梯度高人来指点啊！
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3楼2010-01-30 13:00:07
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zhezhui

木虫 (小有名气)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-01-30 21:49
应该是梯度自身的原因吧
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4楼2010-01-30 18:55:15
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dustheart

铜虫 (初入文坛)
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木笑笑(金币+1):鼓励交流 2010-02-01 23:11
可能是梯度问题

你把最后乙腈的浓度调一下,不要100%,用95%或90%尝试下

另外是DAD检测器的话,可以开全波长扫描看看其紫外吸收
在设检测波长那有扣除本底的波长设置,根据全波长扫描结果设下
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5楼2010-01-30 22:12:36
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heyugudu

银虫 (正式写手)
★ ★
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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 2010-03-24 08:22
我觉得有可能是梯度洗脱的时候设置的问题，每洗脱一次全过程结束后的过度时间要足够长，不然由于流动相变化会引起峰的叠加。
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放眼看天空的颜色…
6楼2010-03-23 17:01:32
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lizgang

木虫 (正式写手)

铁虫
★
笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 2010-03-24 08:22
注意极性
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7楼2010-03-23 21:15:15
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happyer520

木虫 (正式写手)
★
笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 2010-04-06 08:02
是不是低波长下检测？
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8楼2010-04-05 19:49:45
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jsj198037

金虫 (正式写手)
★ ★
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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 2010-04-07 09:04
你可以推算出那时间段的流动相比例是多少
然后尝试在那段时间采用一定浓度的流动相走一段时间
再继续梯度走
应该是梯度引起的基线漂移
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人总是不断的从一个围墙中走到另一个围墙，直到。。。
9楼2010-04-06 17:14:35
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飞云

金虫 (正式写手)
★
junjun517(金币+1):谢谢参与 2010-04-07 11:55
一般就是梯度的事，柱子在梯度中也是不断变化环境的，在就是梯度的流动相是否干净？变梯度时将杂质洗脱下来
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10楼2010-04-07 10:58:33
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