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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于细胞传代问题

细胞传代时(1传),用的培养基没加血清(拿错了,第一次做。。。)
实验后隔天观察,基本看不到细胞了,用的原代细胞密度很大的。

问题是:培养基没有加血清是做错了,但是为什么一点细胞的影子都看不到呢?没加血清的培养基不是也可以作为细胞维持液来使用的么?
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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

确实是细胞裂解了,昨天传的一批:
含血清的培养基传的细胞基本正常,在传后8h观察已有小部分细胞开始铺展
不含血清的培养基传的细胞,在时候后观察还和其他的一样,但是8h后观察已经看不到细胞,所以我估计是不含血清的培养基因为不能抑制蛋白酶的作用,在37°培养后,酶活性最大,导致细胞全部裂解。。。
还有个问题,为什么我用的一个瓶里的细胞,传到新的细胞培养瓶里的细胞铺展速度明显低于种到96孔板里的,96孔板里的细胞有一大半已经铺展延伸,而细胞培养瓶里的只有很小一部分细胞延伸?是因为材质不一样的原因么?
15楼2010-01-27 18:32:16
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gaozx123

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 1-18 21:16
没碰到过这种情况。不过lz是不是没有找到细胞,或许细胞已经全漂到表面了,而调节显微镜的距离也不够看到呢。
2楼2010-01-18 21:10:51
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freshblack

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能因为细胞状态不好~
勤有功,戏无益,满招损,谦得益
3楼2010-01-19 16:25:30
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mouseludi

铁杆木虫 (小有名气)

回2楼:
感觉不像是细胞漂浮,基本上就是观察不到细胞

回3楼:
但是我传代用的原代细胞长的挺好的啊,如果细胞状态不好,我应该注意些什么?谢谢!
4楼2010-01-19 20:45:53
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