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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何提高间并引物的扩增率
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guozilqh

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】如何提高间并引物的扩增率 已有3人参与

如题
没办法只能用间并引物扩增某基因，但是扩增率太低，几乎为千分之一。
且用次黄嘌呤太贵，请教各位有没有什么办法提高扩增率？
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1楼 2010-01-08 07:52:52
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刘超_2009

新虫 (小有名气)
关注该贴，我也不明白
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2楼2010-01-08 09:26:30
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎分析经验 2010-09-11 20:44:17
引物用量根据简并度要增加，我以前就用普通浓度，扩不出来或者太淡，增加后就能扩增出来了
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3楼2010-01-08 09:39:04
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guozilqh

铜虫 (初入文坛)
已经增加浓度了
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4楼2010-01-08 11:00:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
重新设计引物吧，简并度不要太大，另外换用好点的酶，加点镁离子也许有用
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5楼2010-01-08 12:09:02
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yfsuperuser

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问什么叫PCR扩增率？
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6楼2010-09-11 20:38:12
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
根据我的经验，
1. 在较高的模板浓度条件下兼并引物的PCR扩增效率还是可以接受的，
2. 如果不是用于检验的目的，建议你合成若干非兼并的引物，对某个特定模板分别扩增，毕竟单个模板中不需要兼并引物，哪条好用用哪条。
3. 如果还不行，送你的点PCR增强剂，不过只能保证能提高PCR产物的产量，有兴趣可以试试。
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供应PCR增量剂
7楼2010-09-12 09:34:30
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Lee_Py

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
个人觉得 如果你引物设计的特别棒的话 就不用再来提高了 可以尝试一些酶 有些酶的扩增效率比较高
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8楼2010-09-12 11:12:42
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