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【讨论】图位克隆 已有9人参与
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想要通过图位克隆，明确突变基因，不知道如何操作？ 请朋友们献言帮助。 拟南芥 质量性状表型突变体 现在的结果显示，该突变体为3：1隐性突变 突变体为col-0背景 现在已获得和 ller 生态型之间的杂交材料F2代 想确定 突变位点 应该如何进行 ？ [ Last edited by Jack_dong on 2010-5-9 at 09:24 ] |
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三个小石子(金币+2):感谢参与讨论，欢迎常来理工农林版！ 2010-09-08 23:31:42
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| 首先你要筛选在双亲间具有多态性的标记，质量性状你可以当作一个多态性标记加入，然后再构建标记连锁图的过程中，这个质量性状一般会被定位在某两个标记之间，然后你需要在含有目标基因的染色体区段加密标记做精细定位，注意你要做精细定位需要的群体比较大，这样才能捕捉到标记和基因的重组，在做精细定位的过程中你会找到一些重组单株，就是标记和基因有重组的单株，挑出这些单株来进一步加密标记，在田间考察表型（注意种植亲本做对照），直到没有重组单株为止，这样你就获得了和基因紧密连锁的标记，然后构建文库，以这个标记筛选阳性克隆测序，利用软件预测ORF，然后功能验证。笼统来说基本就是这样吧。拟南芥基因组小而且已经有完整的序列，做起来是比较方便的。 |
11楼2010-05-09 16:59:41
2楼2009-12-23 18:23:13
Science298
铜虫 (正式写手)
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不知道你做的什么材料，也不知道你构建了什么群体。就我做的课题范围给你推荐几篇文章了，希望对你有用，不过文章要自己下了！呵呵 Yi B, Chen Y, Lei S, Tu J, Fu T. Fine mapping of the recessive genic male-sterile gene (Bnms1) in Brassica napus L. Theor Appl Genet. 2006, 113: 643-650 167. Xiao L, Yi B, Chen Y F, Huang Z, Chen W, Ma C Z, Tu J X, Fu T D. Molecular markers linked to Bn;rf: a recessive epistatic inhibitor gene of recessive genic male sterility in Brassica napus L., Euphytica, 2008, 164: 377-384 |
3楼2009-12-29 17:17:24
4楼2010-01-02 17:37:20