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guojing0000

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】在线求助关于SDS-page的问题,很着急啊(带图)

我最近在做SDS-PAGE,一直做出来的效果都不理想,想请教大家几个问题:
1. 我要电泳的蛋白质分子量比较小,10-40KD,这是分离胶的配置中需要6M的尿素吗?
2. 我电泳完的胶发现一个特别迷惑的问题。就是前面的带都好好的面比较清晰,但是到后面就特别不清晰了,(如图),想知道这是什么问题
3. 请我我一般改用多大的电流电压跑比较好啊?我定电流8MA效果也不好,定电压140V效果也不好,很迷惑
希望大家给与我多多的指点,我实在是不懂啊~谢谢各位了
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sunysmile

金虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 12-9 21:35
10~~40KD的蛋白跑15%的胶的就可以了
样品处理的时候加入loading buffer  以后煮5~10分钟
 然后高速离心一下再上样
 
8楼2009-12-09 21:24:15
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