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huoshd

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助交流】为什么要做荧光定量PCR?

各位大虾,本人刚刚涉足分子生物学这个领域,看了一些东西,各位能不能告诉我为什么要做荧光定量PCR?荧光定量PCR能应用在那些方面?荧光定量PCR的原理?最好能举例说明下。
在这先谢谢,
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09021122

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
荧光定量PCR:通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品的初始模版。
  原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
2楼2009-11-28 14:24:45
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