关于克隆的假阳性 - 生物科学 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

11楼2009-11-25 10:41:26

MellonCHEN

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 395.8
帖子: 51
在线: 3.2小时
虫号: 611891
注册: 2008-09-25
专业: 应用有机化学

抗生物失效，感受态污染这些都有可能，建议每个细节出检查一下有没有问题。

赞一下

12楼2009-11-25 11:09:17

lying09

银虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 553
帖子: 57
在线: 88.7小时
虫号: 910494
注册: 2009-11-23
专业: 生物化学与分子生物学

会不会是酶切的时候没有切好呢？
楼主，咱同是天涯沦落人，我的也出不来，也正在找原因呢，过来学习学习

赞一下

13楼2009-11-25 19:15:14

溪儿维娅

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 119
帖子: 126
在线: 13.1小时
虫号: 799582
注册: 2009-06-26
性别: MM
专业: 生物化学

哎，我最近真是倒霉啊。质粒提不出来，跑pcr 原来能扩出条带的却做不了重复，都扩不出来了。

赞一下

14楼2009-11-26 04:55:57

yangxiaofei

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 447881

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

建议 1 重新配抗生素 2 在提取质粒之前，做个菌液PCR 看看是提质粒的问题还是本身就不是阳性克隆

15楼2009-11-26 11:56:41

sunpl2323

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 504
帖子: 14
在线: 41分钟
虫号: 600503
注册: 2008-09-12

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

可能长的是酵母，我也遇到过这样的情况！重新转化几次就没问题了

16楼2009-11-26 11:58:15

wordsworth3180

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3624.4
帖子: 703
在线: 337.8小时
虫号: 568607
注册: 2008-06-03
性别: MM
专业: 微生物生理与生物化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by 溪儿维娅 at 2009-11-21 00:45:
我最近做的克隆转化，平板上隔夜都会长出单克隆，但是为什么每次都提不到质粒呢？我也用氯霉素扩增质粒的方法了，但还是提不出来。我咨询过老师和同学，他们有的回答，可能我的平板上长出来的都是假阳性。
...

那连接小片断的话如何避免假阳性呢？
我也是提不出质粒郁闷！

17楼2009-11-26 18:44:17