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gaoyuling

铜虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】毛细管电泳基线乱的处理方法 已有6人参与

毛细管区带电泳进样前基线乱的处理方法
在用毛细管电泳进行分离和检测时,经常会出现基线或谱图不好的情况,下面就这种现象可能存在的原因进行分析,将这种谱图乱分为两种情况,一种为进样前,另一种为进样后来分析,首先看一下进样前出现基线乱、上下乱跳的情况(如图1),及可能的原因。
图1 区带电泳基线谱图
一、进样前出现类似的问题可以按一下步骤来排查:
1、先判断这样的谱图出现的几率,如果是经常出现,那这就说明仪器或是实验条件存在问题;
2、确定柱子处理好了么,新购买的毛细管柱子管壁有很多酯类物质和杂质,而且管壁的羟基也需要活化,如果柱子处理不好很容易出现如图1这样的基线,如果没有处理好,可以按照新主子的处理方法进行处理。
3、如果柱子处理没有问题,我们应该检查一下缓冲溶液是不是存在问题,配置的时间是不是太久了,如果时间太久了,缓冲溶液里边就会出现絮状的物质,这样也会导致上述现象的发生。
4、确定检测器处或柱子的检测口处是不是污染。从仪器上取下卡盒,取下柱子,查看柱子的检测口处和固定毛细管检测窗口的位置是不是不干净,如果有可以把用乙醇清洗或擦拭!
5、检查一下电泳仪的电极是不是弯了,有的时候电极弯了也会影响基线。
经过排查发现发现毛细管的检测口处有污物,用酒精棉将其试去,在走基线,得到如下谱图,如图2所示。

[ Last edited by gaoyuling on 2009-11-11 at 17:31 ]
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haifeng-wang

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
谢谢分享!刚看见!顶!
勤奋、努力、拼搏!!!
4楼2010-11-18 16:25:52
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yensh

金虫 (文坛精英)

优秀版主

很好的经验,谢谢分享
ID已经更换,此ID作废
2楼2009-11-11 17:46:48
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