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gaoyuling铜虫 (正式写手)
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【讨论】毛细管电泳基线乱的处理方法 已有6人参与
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毛细管区带电泳进样前基线乱的处理方法 在用毛细管电泳进行分离和检测时,经常会出现基线或谱图不好的情况,下面就这种现象可能存在的原因进行分析,将这种谱图乱分为两种情况,一种为进样前,另一种为进样后来分析,首先看一下进样前出现基线乱、上下乱跳的情况(如图1),及可能的原因。 图1 区带电泳基线谱图 一、进样前出现类似的问题可以按一下步骤来排查: 1、先判断这样的谱图出现的几率,如果是经常出现,那这就说明仪器或是实验条件存在问题; 2、确定柱子处理好了么,新购买的毛细管柱子管壁有很多酯类物质和杂质,而且管壁的羟基也需要活化,如果柱子处理不好很容易出现如图1这样的基线,如果没有处理好,可以按照新主子的处理方法进行处理。 3、如果柱子处理没有问题,我们应该检查一下缓冲溶液是不是存在问题,配置的时间是不是太久了,如果时间太久了,缓冲溶液里边就会出现絮状的物质,这样也会导致上述现象的发生。 4、确定检测器处或柱子的检测口处是不是污染。从仪器上取下卡盒,取下柱子,查看柱子的检测口处和固定毛细管检测窗口的位置是不是不干净,如果有可以把用乙醇清洗或擦拭! 5、检查一下电泳仪的电极是不是弯了,有的时候电极弯了也会影响基线。 经过排查发现发现毛细管的检测口处有污物,用酒精棉将其试去,在走基线,得到如下谱图,如图2所示。 [ Last edited by gaoyuling on 2009-11-11 at 17:31 ] |
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haifeng-wang
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