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daifeng

银虫 (小有名气)

[交流] 以NADH为底物的酶的酶活测定 已有7人参与

NADH在340nm处有吸光值,我现在利用的酶能氧化NADH成NAD+,所以在测定该酶的酶活时,是利用其在340nm处吸光值的减小来算的,另外我用的是752型分光光度计,在测定中有几个疑问,想请教一下各位虫友:
1、吸光值降低到负值,对酶活的测定影响大吗?
2、在测定中每次吸光值都是降到-0.097,而且在加入一个物质时,酶活降低了将近50%,吸光值还是降到-0.097,这是什么原因呢?
3、在后面的实验中,又发现的是:空白对照后,在放入样品前,发现其吸光值也是-0.097,那么对“2、”能给出的是什么结论呢?
我在这先谢过各位虫友啦^_^
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小猴丫丫

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 齐美凤87 at 2013-08-01 16:06:09
·您还,请问你的NADH单独加缓冲液测的吸光值变化大不大?我在sigma买的NADPH本身很不稳定,单独的吸光值变化大,你有出现过这样的问题吗?

我的是没有加待检测的酶NADH的吸光值下降也很快,你们遇到过这个问题嘛?
10楼2018-09-10 20:24:17
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