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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
支持CTAB , 能很好的去除一些真菌多糖
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
11楼2009-11-09 00:33:59
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王雨云

金虫 (小有名气)

我用的是冷冻干燥研磨法,实验室其他人也是用的这个方法,而且提取出了DNA,可能我的菌体没有研磨充分吧
12楼2009-11-09 09:55:12
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mada1986

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没做过真菌 做细菌的,一直用蛋白酶K来着...
13楼2009-11-10 14:09:00
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王雨云

金虫 (小有名气)

我今天跑了个PCR,结果证明我的总DNA还是提出来了,主要是浓度太低才会出现电泳检测看不到条带,呵呵
14楼2009-11-10 16:11:45
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陈思容

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用的是酶解法破壁、CTAB除多糖、异丙醇沉淀,最后溶解都是用双蒸水50微升,研磨时加石英砂,有书上说研磨20-30min,个人感觉研磨到乳浊状差不多了
15楼2009-11-10 18:26:18
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diaoyuhua

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
研磨充分就行了,不要在外时间过长,还有就是只要提出来了3~5ul跑电泳就够了
16楼2009-11-10 19:02:20
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beisimai895

木虫 (小有名气)

30uL还没跑出来应该不是浓度问题,我提的也是曲霉的基因组,提完后只跑5uL,菌体不易太多,要不然破壁会不充分,至于时间,这个应该以研磨程度来定,只有研磨到最后菌体都成粉未状才行,我一般磨七八分钟。
17楼2009-11-11 11:23:49
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王雨云

金虫 (小有名气)

不是跑电泳加量30ul,是说最后把DNA从柱子上洗下来是加了30ul的TE,跑电泳我是加的5ul,电泳检测时还是没有条带,后来做PCR时证明里面有DNA的存在,她们就说我提的DNA浓度低了。过柱时我都是3管1.5ml的上清过同一个柱子,结果还是浓度低,索性不管它,只要有DNA存在就行了
18楼2009-11-12 14:13:49
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