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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】细胞接种 如何接种好96孔板？
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richenim

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞接种 如何接种好96孔板？ 已有6人参与

最近在做细胞接板，前一天接板，接板后从显微镜里看是分布均匀的，但第二天拿出来看的时候发现大部分细胞都密集在孔板的中间，而四周的细胞数量很少哦，请教下各位怎样才可以让细胞在孔板里均匀啊？（不管我接96孔板还是24孔板和6孔板总是会出现相同的现象）
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1楼 2009-10-27 17:15:16
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lxj46

金虫 (正式写手)
★
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖！ 12-12 22:32
细胞悬液在接板的时候多吹打，为的是细胞分散均匀，另外加进去的时候，移液枪的枪头最好不要碰到壁或者底部，也就是悬空加，这样效果会好一些。
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这是最好的年代，人民不需要自由！
8楼2009-12-12 19:45:02
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魔头头

新虫 (初入文坛)
★ ★
472514568(金币+1,VIP+0):给个红包 奖励一下！ 10-27 22:17
richenim(金币+1,VIP+0): 10-28 09:06
引用回帖:
Originally posted by richenim at 2009-10-27 21:14:


是人癌细胞，它是在一个孔里中间和四周不均匀，不是孔间的细胞数不均匀哦。

癌细胞表面的微绒毛多而细密，微丝走行不如正常细胞规则，可能与肿瘤细胞具有不定向运动和锚着不依赖性有关。
所以只要你接种在96孔之前吹打均匀，即使过后长得不均匀，应该也没有什么关系，因为细胞毕竟是活的，有行走的自由。

我之前养过，通常接种后细胞较多的部位，后来都会长的比较密的。
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6楼2009-10-27 21:47:47
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普通回帖

魔头头

新虫 (初入文坛)
★
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖交流！ 10-27 22:17
你接种的是什么细胞，注意在接种之前要将培养瓶里的细胞吹打均匀，每次接一孔在培养瓶里吹一下，因为如果没有吹打，细胞会沉淀在底部，这样你吸出来的时候，每次细胞都会比较少哦
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2楼2009-10-27 20:37:38
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dianwuxian

铁虫 (小有名气)
你使用的是一次性的板子还是重复使用的啊，若是重复使用的就得处理好，要不细胞不能贴壁。再就是在接板的时候注意不要产生气泡。还有你的细胞是什么细胞啊，这么个长法？
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3楼2009-10-27 21:03:47
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 魔头头 at 2009-10-27 20:37:
你接种的是什么细胞，注意在接种之前要将培养瓶里的细胞吹打均匀，每次接一孔在培养瓶里吹一下，因为如果没有吹打，细胞会沉淀在底部，这样你吸出来的时候，每次细胞都会比较少哦

是人癌细胞，它是在一个孔里中间和四周不均匀，不是孔间的细胞数不均匀哦。
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4楼2009-10-27 21:14:44
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dianwuxian at 2009-10-27 21:03:
你使用的是一次性的板子还是重复使用的啊，若是重复使用的就得处理好，要不细胞不能贴壁。再就是在接板的时候注意不要产生气泡。还有你的细胞是什么细胞啊，这么个长法？

我用的是一次性的板子，是人癌细胞，应该与我的细胞无关吧，估计是我接板的时候操作不怎么正确哦。
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5楼2009-10-27 21:16:54
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魔头头

新虫 (初入文坛)
癌细胞或培养中发生恶性转化后的单个细胞培养时，形成集落（克隆）的能力比正常细胞强。
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7楼2009-10-27 21:49:29
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新开始

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1):3Q 2010-01-28 01:14
如果细胞没问题的话，我觉得主要就是注意下面几个方面：种板前一定先在培养吹打均匀，悬空滴加，然后加过一排孔以后要再将培养瓶或者15ml离心管里的细胞吹一下，最后就是加完以后可以适当的摇晃一下，但是不要过激，以防培养液溅出。
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革命尚未成功，还要一直努力！
9楼2010-01-27 23:54:50
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qwe_123098

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
除根细胞本身有关外，你所使用的细胞培养板底是否平整？
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10楼2010-01-28 13:35:21
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