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dongchao

金虫 (小有名气)

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专业: 微生物资源与分类学

★
haizhenliu(金币+1):谢谢参与

生物实验常见的问题,有时确实无法解释,祝有好运气

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11楼2009-09-08 15:04:20

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zhyzx

金虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 9-8 20:54

一般情况下，试剂盒提DNA效果会比较好一点，手提的话有很多过程会导致不好的效果。植物的做的不多，不过建议你提完之后可以放在65°水浴20分钟，除去污染。

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12楼2009-09-08 15:59:06

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charlies929

至尊木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 9-8 20:55

我就碰到过类似问题的，用PCR扩增出来的片段跑电泳还好好的，胶回收以后就少很多，-20放几天就降解了，老板分析是染了DNA酶，后来东西都换了一套就好了。

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13楼2009-09-08 16:06:42

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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

BioEPI: 1
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amisking(金币+5,VIP+0):鼓励一个！ 9-8 20:55

1`在液氮冷冻条件下研磨成粉末状；
② 加入0.6 ml的2×CTAB提取液（用前加入0.2﹪的巯基乙醇），振荡混匀。65℃水浴30 min，每10 min颠倒混匀一次；
③ 取出离心管，冷却后加入0.6 ml酚/氯仿，振荡混匀；
④ 13,800 rpm，室温离心4 min；
⑤ 将上清转移到另一1.5ml离心管中；
⑥ 加等体积氯仿混匀，13,800 rpm，离心4 min，取上清；
⑦ 加入2倍体积的无水乙醇，上下颠倒混匀，-80℃放置30 min；
⑧ 4℃，15,800g，离心20 min；
⑨ 弃上清，70%乙醇洗2次，室温下干燥沉淀；
⑩ 加入25μl无菌水溶解DNA；

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14楼2009-09-08 16:23:35

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