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stefa

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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-9-2 08:21:
考虑更换loading buffer，有可能是污染了蛋白，比如皮屑掉进去都会污染的

污染后会造成这种现象吗，每次都是这个位置出现这样的情况

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11楼2009-09-02 09:34:20

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stefa

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Originally posted by yang22181 at 2009-9-2 08:26:
可能是较大分子量的蛋白，你的胶浓度可适量降低些

我分离胶浓度是12%

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12楼2009-09-02 09:35:54

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susizheng

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Originally posted by stefa at 2009-9-2 09:33:

就是取1ml发酵液离心后，沉淀中加入100ul的loading buffer
煮沸5min，冷却后上样电泳

上样前为什么不离心下呢？杂质很容易导致蛋白在点样孔附近滞留的。

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Thank-you，so-blue.

13楼2009-09-02 13:45:16

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puma2003

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你点一个marker 看看是不是也会有啊？

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14楼2009-09-02 14:08:58

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stefa

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Originally posted by susizheng at 2009-9-2 13:45:

上样前为什么不离心下呢？杂质很容易导致蛋白在点样孔附近滞留的。

离心过了的

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15楼2009-09-02 18:20:21

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stefa

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Originally posted by puma2003 at 2009-9-2 14:08:
你点一个marker 看看是不是也会有啊？

marker没有这样

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16楼2009-09-02 18:20:37

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snoopyzxx

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应该是样品的问题，建议上样前离心。

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生物资源交流QQ群：1044518333

17楼2009-09-02 20:52:42

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l_inhumain

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看看你的发酵液离子强度是不是合适，太高的话可能出现上面这种情况的。煮过之后确实要离下心的。

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18楼2009-09-02 23:45:49

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stefa

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Originally posted by l_inhumain at 2009-9-2 23:45:
看看你的发酵液离子强度是不是合适，太高的话可能出现上面这种情况的。煮过之后确实要离下心的。

发酵用的LB培养基用去离子水配的这个应该没问题啊

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19楼2009-09-03 09:12:03

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liguanjun

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可能是胶的问题吧

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20楼2009-09-03 11:10:24

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