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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-9-2 08:21:
考虑更换loading buffer，有可能是污染了蛋白，比如皮屑掉进去都会污染的

污染后会造成这种现象吗，每次都是这个位置出现这样的情况
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11楼2009-09-02 09:34:20
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yang22181 at 2009-9-2 08:26:
可能是较大分子量的蛋白，你的胶浓度可适量降低些

我分离胶浓度是12%
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12楼2009-09-02 09:35:54
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
引用回帖:
Originally posted by stefa at 2009-9-2 09:33:

就是取1ml发酵液离心后，沉淀中加入100ul的loading buffer
煮沸5min，冷却后上样电泳

上样前为什么不离心下呢？杂质很容易导致蛋白在点样孔附近滞留的。
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Thank-you，so-blue.
13楼2009-09-02 13:45:16
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你点一个marker 看看是不是也会有啊？
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14楼2009-09-02 14:08:58
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-9-2 13:45:

上样前为什么不离心下呢？杂质很容易导致蛋白在点样孔附近滞留的。

离心过了的
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15楼2009-09-02 18:20:21
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by puma2003 at 2009-9-2 14:08:
你点一个marker 看看是不是也会有啊？

marker没有这样
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16楼2009-09-02 18:20:37
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是样品的问题，建议上样前离心。
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生物资源交流QQ群：1044518333
17楼2009-09-02 20:52:42
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l_inhumain

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看看你的发酵液离子强度是不是合适，太高的话可能出现上面这种情况的。煮过之后确实要离下心的。
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18楼2009-09-02 23:45:49
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by l_inhumain at 2009-9-2 23:45:
看看你的发酵液离子强度是不是合适，太高的话可能出现上面这种情况的。煮过之后确实要离下心的。

发酵用的LB培养基 用去离子水配的 这个应该没问题啊
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19楼2009-09-03 09:12:03
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liguanjun

银虫 (小有名气)
可能是胶的问题吧
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20楼2009-09-03 11:10:24
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