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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：怎样用培养的细胞做PCR
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beike2208

木虫 (初入文坛)
收获不小啊
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11楼2009-08-25 19:32:34
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蝶谷医仙

新虫 (小有名气)
我是外科医生，从没进过实验室，汗！
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12楼2009-08-26 09:18:14
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witch-dj

木虫 (著名写手)

快乐家族-witchdj
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
学习下，楼主要清楚实验目的啊，问你老板吧！
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13楼2009-08-26 16:57:49
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bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2009-8-25 10:21:
这位老兄都不知道自己再干什么，你们就盲目的叫他这，叫他那！恐怕他都不知道自己什么专业出身，要是生物专业的人，你可给我们生物人“小孩他妈丢了——丢大人了！”你老板是想让你检测一下目的基因存在与否。你就 ...

人才，向你学习向你致敬^_^
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头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒，哥一直帅的很低调，仰角45°深深陶醉中....
14楼2009-09-05 10:37:25
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

不敢当

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
向我学习不敢当，只是互相交流一下罢了。大家都相互交流，中国何愁看不到曙光啊！大家一起来！
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15楼2009-09-05 18:51:38
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caicaiyy

铜虫 (小有名气)

我来说一下

★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 10-7 16:54
你培养的是真核生物，应该做RT-PCR。因为真核生物基因中有内含子，不能直接PCR，即使P了，也是P处一大堆“垃圾基因”。回去学下怎样做RT-PCR。
我这里简单讲下：
1.提取细胞的总RNA，建议用trizol法。
2.立即进行反转入成CDNA。
3.从NCBI上或者基因bank上找到你要的目的蛋白的基因序列。设计引物。
4.送去公司合成引物。
5.做PCR
6.跑电泳
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16楼2009-10-07 15:43:04
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caicaiyy

铜虫 (小有名气)
一定的做RT-PCR，而且用药前后都得做，然后对比。
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17楼2009-10-07 15:49:07
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